首先說下什么叫落射熒光法？物質(zhì)發(fā)射熒光的特性所設(shè)計(jì)的一類光學(xué)法，讓某些芳香環(huán)、芳香雜環(huán)化合物具有發(fā)射熒光的特性，其發(fā)射熒光的強(qiáng)度和物質(zhì)濃度呈線性關(guān)系。落射光激發(fā)的熒光法簡稱為落射熒光法，在近代時期，顯微鏡檢檢測技術(shù)中發(fā)現(xiàn)了一種強(qiáng)有力的反差增強(qiáng)法。將激發(fā)熒光用的光源改在物鏡的上方，光由物鏡上方經(jīng)反光鏡射入物鏡去激發(fā)樣品，從樣品上被激發(fā)的熒光經(jīng)物鏡成像并穿透反光鏡而由目鏡觀察。

熒光方法是利用波長較短的紫外光、紫光、藍(lán)紫光、藍(lán)光及綠光等去激發(fā)樣品，只要樣品中含有可產(chǎn)生熒光的成分，它便吸收短波的激發(fā)光而釋放出波長較長的熒光。熒光方法廣泛應(yīng)用于生物學(xué)及工業(yè)的特異性研究,接下來說下附有熒光部件的顯微鏡調(diào)整的方法。

一、顯微鏡汞燈怎么安裝？

（1）取出汞燈將其小心安裝在上電極散熱帽上，注意手指不能直接接觸燈管和散熱帽的正面，汞燈的封氣口要對向散熱帽的左側(cè)或右側(cè)；

（2）把汞燈的上電極安裝并固定在散熱帽底面的小孔上，再把電極及上電極引線另一端，分別安裝在燈座上各自的插孔中并固定；

（3）鎖緊散熱片上的螺絲后，把汞燈連同燈座及散熱帽小心裝入燈室中，鎖緊相應(yīng)的螺絲，燈座上的連線和插座插到汞燈電源后部專用的插座上。

二、汞燈燈室調(diào)整：

（1）接通汞燈電源，讓汞燈預(yù)熱10-15分鐘；

（2）把汞燈燈室擺放在桌面上，讓汞弧投影到2-3m外的墻上，劃一條與燈室窗口中心線水平線作為參考線；

（3）轉(zhuǎn)動燈室調(diào)焦旋鈕，使汞弧的像清晰地投影于墻上；

（4）分別調(diào)節(jié)燈室外殼上的5個調(diào)節(jié)螺絲孔，把汞弧的像其反射像調(diào)成并排且盡量靠近，但不要重疊在一起。

三、如何檢測汞弧？

（1）將汞燈照明光路系統(tǒng)中的視場光闌開到最大；

（2）把熒光濾光片組推到藍(lán)光激發(fā)的位置上，以避免汞燈中的藍(lán)光太刺眼；

（3）把觀察的樣品或一塊載玻片放在物臺上，蓋上一張比蓋玻片稍大且潔白的薄紙；

（4）取下一個物鏡，使激發(fā)的藍(lán)光經(jīng)物鏡轉(zhuǎn)換器的空檔照在白紙上，白紙上會有一藍(lán)色的圓形照明區(qū)域，汞弧像出現(xiàn)在區(qū)域的中央?yún)^(qū)域，調(diào)節(jié)燈室外殼上的5個調(diào)節(jié)螺絲孔，直至汞弧的像及其反射像并排在照明區(qū)域的中央位置。

（5）仔細(xì)調(diào)焦，可看清白紙的纖維；取去白紙，樣品上的熒光細(xì)節(jié)隱約可見而很容易調(diào)焦清晰。